Серологическая диагностика гриппа в ртга.

Цель: определение а/т к вирусу гриппа в сыворотке крови и их нарастание в парных сыворотках.

Компоненты: сыворотка крови, антиген вируса гриппа (гемагглютинин) и эритроциты.

Движение: РТГА это вариант РН, основана на нейтрализации гемагглютинирующих особенностей вирусов своеобразными а/т находящимися в сыворотки больного, что проявляется отсутствием агглютинации эритроцитов с формированием на дне лунки компактного осадка (точечка, а не зонтик). Сыворотки крови обрабатывают периодатом калия для устранения неспецифических ингибиторов агглютинации, после этого к различным разведениям сыворотки додают равное кол-во известных вирусных частиц (антигенов) и инкубируют. По окончании чего додают, равны количество 1,0% взвеси эритроцитов, инкубируют и просматривают итог. Диагностическим титром вычисляют громаднейшее разведение, в котором тормозится гемагглютинация.

Обнаружение вируса гепатита А при иммунной электронной микроскопии:

Цель: обнаружение обнаружение вируса в материале и идентификация:

Компоненты: материал от больного, антивирусной сыворотки, контрастирующее вещество.

Движение: материал содержащий вирусов обрабатывают антивирусной сывороткой содержащей антилела к HAVAg, после этого додают фосфорно-вольфрамовую кислоту для контрастирования. Смесь наносят на пленку и высушивают. После этого микроскопируют в электронном микроскопе и находят скопление вирусных частиц.

Экспресс-Ds-ка ротавирусной инфекции в реакции гемадсорбции на жёсткой базе (РГагТО):

Цель: определение антигенов ротавируса вируса в материале.

Компоненты: противоротавирусная сыворотка (а/т), материал от больного с вирусом и его а/г, сенсибилизированные иммуноглобулином эритроциты.

Движение: лунки полистироловых планшетов обрабатывают противоротавирусной сывороткой, после этого вносят в них исследуемый вируссодержащий материал и через 30-60 мин. лунки промывают буферным раствором, по окончании чего додают взвесь сенсибилизированных своеобразным иммуноглобулином эритроцитов и через 30-60 мин. просматривают итог. В случае, если в материале был вирусный антиген, он соединяется с антителами сыворотки адсорбированными на поверхности лунки, а после этого с иммуноглобулином на поверхности эпитроцитов и происходит гемагглютинация.

Обнаружение антигенных маркеров вируса неистовства при помощи РИФ:

Цель: обнаружение а/г вируса неистовства.

Компоненты: культура клеток инфицированная материалом от больного (с а/г), антирабического иммуноглобулина либо моноклинальных антител, меченных флюорохромом (флюорисцином).

Движение: культуру клеток обрабатывают меченым иммуноглобулином и микроскопируют. При наличии вируса в клетке а/т адсорбируются на клетке и отмечается ее свечение.

Идентификация вируса гриппа в аллантоисной жидкости РКЭ в РТГА:

Цель: идентификация вируса гриппа по известным антителам.

Компоненты: аллантоисная жидкость инфицированного вирусом РКЭ, противогриппозные диагностические сыворотки типа А, В, С и эритроциты кур.

Движение: Р-я основана на нейтрализации гемагглютинирующей активности вируса разных типов вируса гриппа А, В, С соответствующими сыворотками. Смесь соответствующей сыворотки и аллантоисной жидкости смешивают с эритроцитарный взвесью. Отсутствие гемагглютинации с одной из сывороток, говорит о типе вируса.

Идентификация вируса гриппа в аллантоисной жидкости РКЭ в РГА:

Цель: определение вируса либо его а/г в материале.

Компоненты: Аллантоисную жидкость РКЭ инфицированного материалом от больного, эритроциты кур.

Движение: Аллантоисную жидкость титруя разводят от 1:10 до 1:52 и вносят по 0,5 мл в лунки планшета, и додают по 0,5 мл 1% взвеси эритроцитов кур, инкубируют 40 мин. и просматривают итог. Гемагглютинация говорит о наличии вируса в аллантоисной жидкости.

Серологическая диагностика кори при помощи РНГА:

Цель: обнаружение а/т к вирусу кори в нарастание и сыворотки крови их титра.

Компоненты: сыворотка крови больного, эритроцитарный коревой диагностикам.

Движение: Основана на способности эритроцитов с адсорбированными на их поверхности а/г к вирусу кори взаимодействовать с а/т в образовании и сыворотке крови на дне луки в виде фестончатого осадка (зонтик с неровными краями).

Серологический способ диагностики клещевого энцефалита при помощи РСК:

Цель: определение а/т в нарастание и сыворотки крови их титра.

Компоненты: парные сыворотки крови больного, а/г клещевого энцефалита для РСК, эритроциты барана и гемолитическая сыворотка.

Движение: 1 фага – антитела в сывороточных разведениях взаимодействуют с а/г диагностикума, в следствии чего происходит связывание комплимента. 2 фаза – индикаторная – определение в смеси наличия свободного комплемента методом добавления гемолитической совокупности (гемолитическая сыворотка и эритроциты барана), в случае, если комплимент свободен, то происходит гемолиз эритроцитов (РСК отрицательная), а вдруг комплимент связан, то гемолиз не наступает (РСК хорошая).

Определение антител к вирусу ВИЧ при помощи ИФА:

Цель: определение а/т в ВИЧ.

Компоненты: антигены ВИЧ, сыворотка крови больного, антиглобулиновую людскую сыворотку меченую ферментом пероксидазой хрена субстрат для фермента.

Движение: сыворотку крови додают в лунки планшета с адсорбированными а/г ВИЧ и инкубируют. После этого лунки отмывают и додают антиглобулиновую сыворотку меченую ферментом., после этого опять отмывают и додают субстрат для фермента с индикатором. В случае, если в сыворотке а/т нет, то адсорбция последующих компонентов реакции и разложение субстрата не отмечается.

Определение маркеров вируса гепатита В при помощи ИФА:

Цель: обнаружение а/г HBsAg в сыворотки крови больного.

Компоненты: сыворотка крови, антитела к HBsAg.

Движение: смори выше.

Иммуноблотинг:

Цель: обнаружение а/т в ВИЧ.

Компоненты: сыворотка крови больного, полосы с «блотами» антигенов, полученные электрофорезом а/г в акриловом геле, меченная ферментом антиглобулиновая сыворотка человека.

Движение: на полосы наносят сыворотку крови и инкубируют, после этого отмывают и наносят меченую антиглобулиновую сыворотку. Появившийся комплекс а/г-а/т-анти-а/т выявляют добавлением субстрата, изменяющего окраску при действии фермента.

Эволюция вируса гриппа — Георгий Базыкин


Интересные записи:

Понравилась статья? Поделиться с друзьями: